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植物基因組DNA提取 (磁珠法）

發布時(shí)間(jiān)：

2024-03-22 08:47

植物基因組DNA提取

(磁珠法）

 

小(xiǎo)麥是我國主要糧食作(zuò)物之一，所以關于小(xiǎo)麥分子生(shēng)物學方面的研究也非常重要，技(jì)術(shù)也日益深入，不論是基因克隆與轉化，遺傳圖譜構建，特定基因型檢測，分子标記輔助育種及DNA指紋數(shù)據庫構建等，在小(xiǎo)麥育種中應用廣泛，高(gāo)質量的DNA提取的在分子水(shuǐ)平上(shàng)對植物進行(xíng)系統分析與研究的基礎，而植物基因組DNA提取的方法有(yǒu)許多(duō)，但(dàn)是多(duō)數(shù)需要以植物新鮮組織為(wèi)樣本，這樣限制(zhì)條件較多(duō)且步驟多(duō)，耗時(shí)長。而植物種子可(kě)以在常溫下保存，這樣作(zuò)為(wèi)提取基因DNA時(shí)可(kě)以不受季節和(hé)形态等問題限制(zhì)。下面我們以多(duō)種植物種子為(wèi)實驗材料采用

上(shàng)海領駿生(shēng)物有(yǒu)限公司的植物基因組DNA提取試劑盒（磁珠法）提取植物基因組DNA

這種試劑盒內(nèi)包括裂解結合液、磁珠、異丙醇、PK、DTT、洗滌液，還(hái)有(yǒu)洗脫液等試劑。

  • 樣本處理(lǐ)

  花(huā)生(shēng) 玉米 小(xiǎo)麥

  • 裂解結合

在使用時(shí)，需要将種子樣本放置研缽中破碎，然後加入裂解結合液，使DNA/RNA從細胞中釋放出來(lái)，然後離心取上(shàng)清。

  • 洗滌

使用試劑盒中的洗滌液進行(xíng)洗滌，這一步可(kě)提高(gāo)基因組的純度。不同樣本可(kě)進行(xíng)輕微調整。

  • 洗脫

洗脫的步驟是将吸附在磁珠表面的基因組DNA洗脫下來(lái)，并溶于洗脫液中，然後進行(xíng)其他下遊實驗。

現将結果報道(dào)如下：

案例1：同一批次試劑提取不同植物種子的實驗結果：

樣本

序号

A260/A280

A260/A230

Conc.(ng/μL)

花(huā)生(shēng)胚芽5 mg

1

1.903

1.063

391.85

2

1.935

1.162

388.85

3

1.950

1.195

395.45

平均值

1.929

1.140

392.05

玉米20 mg

4

2.192

1.897

518.35

5

2.180

1.896

542.1

6

2.188

1.906

538.9

平均值

2.187

1.9

533.117

小(xiǎo)麥10 mg

7

2.03

1.32

77.65

8

2.006

1.316

80.85

9

2.003

1.268

81.4

平均值

2.013

1.301

79.967

 

  

圖1 核酸提取電(diàn)泳圖

未因生物科技（上海）有限公司成立于2016年，位于上(shàng)海市青浦區(qū)張江雲立方園區(qū)。公司長期緻力于生(shēng)物領域內(nèi)相關産品的研發、生(shēng)産和(hé)銷售，産品主要包括磁性納米材料和(hé)磁珠法核酸提取純化試劑。公司一直堅持以“質量、誠信、團結、奮進”為(wèi)宗旨，嚴格規範質量管理(lǐ)體(tǐ)系，持續創新、精益求精，為(wèi)客戶提供優質的産品和(hé)服務，被認定為(wèi)上(shàng)海市專精特新企業。

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